I følge WHOs statistikk har 25 millioner mennesker dødd av AIDS i løpet av de siste 40 årene. Skadene fra denne infeksjonen er enorme. De fleste av de smittede viste seg å være i Afrika, hvor denne infeksjonen kom fra. Med HIV blir diagnosen av sykdommen spesielt relevant. Riktignok finnes det ingen kurer for HIV ennå, men tidlig behandling kan forlenge pasientens liv og forbedre kvaliteten.
Diagnose av HIV-infeksjon
HIV-infeksjon bestemmes på forskjellige stadier ved hjelp av følgende metoder:
- ELISA - enzymimmunanalyse.
- Western blot.
- PCR - polymerasekjedereaksjon.
- Raske tester.
PCR-metoden ble utviklet av den amerikanske biokjemikeren Kary Mullis, som mottok Nobelprisen for den i 1983. I dag regnes denne metoden i medisin for diagnostisering av alle infeksjoner som den ledende på grunn av dens nøyaktighet og informasjonsinnhold. HIV er intet unntak i denne forbindelse.
essensen av analysen
Enhver levende celle inneholder RNA og DNA. Disse nukleinsyrene er i stand til selvkopiering og selvreplikasjon. For hver infeksjon er DNA-fragmenter unike. PÅi biologiske væsker sirkulerer disse fragmentene av nukleinsyrer. De fanges og gjenkjennes av spesialutstyr - reaktoren. Dette er grunnlaget for metoden. Laboratorieassistenten teller disse fragmentene. Retroviruset HIV overvåkes for RNA. Selv med enkeltkopier av virale partikler, kan PCR oppdage og telle dem.
Venøst blod brukes oftest som testvæske. Metodens spesielle komponenter binder seg til viruspartiklene og gjør dem detekterbare, fordi fragmentene som blir funnet multipliseres.
Ved HIV kan resultatet av tilstedeværelsen av viruset oppnås lenge før klinikken dukker opp. Derfor, på grunn av sin høye sensitivitet, har PCR en så høy diagnostisk verdi. Et stort pluss med PCR er allsidigheten til metoden. Inkubasjonsperioden for infeksjon for PCR er ingen hindring.
Forskningskostnad
PCR-metoden er ganske dyr. Dette er en av dens store ulemper. Det krever det nyeste utstyret og høyt kvalifisert laboratorieassistent. På bakgrunn av det foregående utføres ikke PCR-diagnostikk i små bygder. Du kan bare bli testet i spesialiserte store klinikker.
Kostnadene for HIV-DNA-testing i Moskva-klinikker starter fra 2 800 rubler, viral belastning (vir alt RNA i plasma) bestemmes ved PCR - fra 8 800 rubler, og HIV-resistens mot proteasehemmere - fra 16 500 rubler. Som du kan se er prisene ganske høye. PCR kan gjøres gratis i offentlige klinikker under MHI-policyen. Viktig,at prosedyren kan gjøres anonymt. I registeret får pasienten et nummer som han kan finne ut resultatet på. I moderne medisinske sentre er det personlige kontoer til klienter hvor disse dataene vil bli lagt inn.
Forskningsmål
PCR-diagnostikk for HIV er foreskrevet i slike tilfeller:
- Deteksjon av infeksjon hos et barn født av en syk mor eller bærer for å fastslå intrauterin infeksjon.
- Hvis ELISA ga tvilsomme resultater (PCR for HIV hjelper i dette tilfellet med å stille en endelig diagnose).
- For å oppdage det kvantitative innholdet av viruset i kroppen.
- Med en positiv immunblotting utfyller de hverandre med PCR.
- Tester givere.
- For tidlig diagnose av HIV.
- For å bestemme effektiviteten og motstanden mot ART.
Fordelen med denne analysen er at PCR for HIV kan utføres selv for barn under ett år.
Forskning utføres ofte ikke for primærdiagnose, men allerede i behandlingsprosessen. Primærdiagnostikk er serologiske studier (de bestemmer nivået av antistoffer mot HIV). Hvis et falskt positivt resultat gjentas, kan dette være med lav virusmengde.
PCR diagnostiserer HIV når det ikke finnes antistoffer mot det ennå. ELISA-metoden vil i dette tilfellet ikke gi noe svar.
Og PCR for HIV vil allerede være positiv. Men symptomene på denne perioden med HIV er uspesifikke. Pasienten behandles først over lengre tid og uten hell for ARVI av en allmennlege. Man bør huske på at diagnosen HIV kun er basert påPCR er ikke satt, det er nødvendig å bestå andre omfattende tester. PCR-metoden er oftere hjelpemiddel for vanskelige saker.
Forbereder for analyse
Før du tar PCR for HIV, 2 dager før testen, bør du ikke spise fet mat, alkohol. Det er også bedre å ikke anstrenge seg ment alt og fysisk. Hvis pasienten får foreskrevet en immunstimuleringskur, stoppes den 2 uker før analysen.
Blod tas best om morgenen. Andre biologiske væsker i kroppen (sperm, skjedesekresjon) kan også undersøkes, men blod er det beste materialet. Spytt, svette, urin og tårer brukes ikke, siden innholdet av viruset i dem er minim alt.
Pluser av PCR for HIV
Fordelene med metoden er den ekstremt lave sannsynligheten for et falskt positivt resultat, universaliteten til reaksjonen for alle biologiske væsker i kroppen. Analyse har et bredt spekter:
- Én blodprøve kan brukes til å oppdage forskjellige infeksjoner.
- Teknikken haster, resultatet er klart allerede neste dag.
- Konfidensen er mellom 85 og 98%.
- Tilstedeværelsen av HIV kan fastslås 10-14 dager etter infeksjon (det er ingen antistoffer på dette tidspunktet ennå).
- Ingen aldersgrense, kan utføres umiddelbart fra fødselen.
Ulemper med metoden
Ulempene med PCR er som følger:
- Analysekostnader.
- Krever sofistikert medisinsk utstyr.
- Krever høyt kvalifisert laboratorieassistent og lege,taker analyse.
- Reaksjonen er svært sensitiv, så feilen kan være 20%.
- Kan gi et falskt positivt resultat hvis pasienten har autoimmune prosesser, onkologi, kroniske infeksjoner.
- Spesiell renslighet av laboratorielokalene er nødvendig, fordi viruset kan komme inn i analysen fra luften. Da blir resultatet feil.
For laboratorier som driver PCR, for å forbedre kvaliteten på diagnostikk, er det utviklet spesielle strenge tiltak i henhold til SanPiN-systemet for internkontroll. I tillegg må alle arbeidsreglene med denne teknikken overholdes:
- Påkrevd for å strengt følge informasjonen på reagensrørene.
- Før blodprøvetaking, se på nytt og sørg for at analysen er planlagt.
- Sykepleieren må merke rørene riktig.
- Laboratorieassistenten må utføre alle manipulasjoner med biomaterialet korrekt for å forhindre krysskontaminering.
- Testsystemet må være av utmerket kvalitet.
Bare hvis alle disse betingelsene er oppfylt, kan feilen i svaret bare være omtrent 2 % av episodene.
Analysevarighet
Mange er interessert i hvor lenge PCR for HIV vil være klar. Diagnosen varer ikke mer enn 8 timer. Pasienten kan få svar allerede dagen etter. Ekspresstesting utføres innen 2 timer.
PCR-pålitelighet
Til tross for sine mange fordeler, anses ikke PCR som en ideell diagnostisk metode. Han kontaktes i tilfellebehovet for å få screeningtester for tilstedeværelse av HIV i kroppen.
Når tas blod for analyse?
Hvor lenge skal jeg ta PCR for HIV? Et pålitelig resultat kan oppnås allerede når du tar blod 4-4 dager etter den påståtte infeksjonen. Etter 2 uker vil reliabiliteten for HIV være 98%, og med en periode på 5 dager - 80%. Tilstedeværelsen av et negativt resultat i PCR for HIV vil være pålitelig, men for et absolutt nøyaktig resultat utføres også ELISA
ELISA-analyse vil bare være effektiv hvis det er antistoffer mot viruset, denne tiden kan ta fra 1-3 måneder til seks måneder. Siden ELISA gir høyere sannsynlighet (98 % -99,9 %), kan ikke PCR kalles en 100 % bekreftende test for tilstedeværelse av HIV-infeksjon. Men på den annen side er dette den eneste teknikken der du ikke trenger å vente på at antistoffer dukker opp.
Med HIV kan PCR gi informasjon om effektiviteten av ART, stadium av HIV-sykdom og antall VN-er (en kvantitativ vurdering av tilstedeværelsen av HIV i kroppen). Dette vil snakke om alvorlighetsgraden og omfanget av endringen.
PCR-testing for HIV er også nødvendig hvis det er antistoffer i blodet, men deres tilstedeværelse indikerer ikke påliteligheten av HIV-infeksjon klinisk.
De er testet ikke bare for infeksjon og tilfeldig sex. Andre anledninger:
- Planlegging av graviditet.
- Kommende operasjon.
- tilfeldig sex.
- Noen yrker krever denne testen for opptak til arbeid (lærere, leger og annet medisinsk personell).
- Prisoners.
- TB-pasienter.
- Ansatte i Beredskapsdepartementet og politiet.
- Returnert fra ferie fra eksotiske land (hvis du vil forsikre deg om at det ikke er noen infeksjon).
- Prostituerte.
- Utenlandske studenter.
- Drugs.
Også kan visse symptomer hos en pasient tvinge frem en HIV-test:
- Plutselig vekttap.
- Diaré som varer i mer enn 3 uker
- Urimelig høy temperatur over lang tid.
- Hovne lymfeknuter.
- Uforklarlig årsak til lungebetennelse, candidiasis osv.
Å dechiffrere analysen er den behandlende legens privilegium, ikke laboratorieassistenten.
PCR eller ELISA, hva er bedre?
Når PCR-diagnose av HIV-virus RNA påvises både kvalitativt og kvantitativt. Denne analysen identifiserer tydelig et spesifikt patogen selv om det er flere kryssreagerende patogener. Biologisk materiale kan brukes selv i tørket form. Ulempen er den høye sensitiviteten til PCR, når et falskt positivt resultat kan gis ved tilstedeværelse av til og med en liten mengde fremmed DNA på instrumenter eller et reagensrør.
Oppgaven og muligheten for ELISA er å bestemme tilstedeværelsen av antistoffer mot et retrovirus. Selv om nøyaktigheten er 99 %, kan den ikke brukes i de tidlige stadiene.
Kvalitativ HIV-testing
Høykvalitets PCR for HIV bestemmer tilstedeværelsen av viruset i kroppen. Resultatene i dette tilfellet vil se slik ut: positive, falske positive, negative. Men denne studien vil ikke gi informasjon om mengden retrovirus. En slik kvalitativ analyseupassende når HIV-infeksjon allerede er oppdaget i kroppen på andre måter.
Det er umulig å kontrollere effektiviteten av behandlingen med høykvalitets PCR.
HIV-kvantifisering
Utføres kun av HIV-smittede for å telle antall kopier av virus-RNA i et biologisk produkt.
Hensikten med en slik studie er å overvåke den pågående behandlingen og identifisere virusets resistens mot det. Antiviral terapi i slike beregninger er ikke blindt foreskrevet av en lege, så det vil være mer effektivt. Kvantitativ PCR for HIV-infeksjon gjøres mye oftere. Denne analysen vises som en kopi/ml blod.
Hvilke resultater kan gis:
- Virus-RNA er fraværende eller svært lite (ca. 20 kopier/ml). Ingen sikkerhet for diagnosen.
- Fra 20 - til 10 til 6. grads kopier / ml - diagnosen er pålitelig
- Mer enn 106 kopier/ml – høy VN.
Laboratorier kan utføre sanntids PCR-testing for HIV. Dette innebærer observasjon og numerisk evaluering av akkumulering av PCR-produkter med automatisk registrering av resultater.
